微流控芯片電泳測定產品說明:

背景介紹：

高密度脂蛋白(HDL)根據其密度、大小和組成可分為幾個亞組分。越來越多的證據表明，HDL亞組分在動脈粥樣硬化的發病機制中具有非常不同的作用。在高密度脂蛋白亞組分的研究中產生不同結果的部分原因是由于對非常小的高密度脂蛋白顆粒(直徑5-12納米)進行檢測的技術挑戰。有幾種不同的方法可用于檢測HDL顆粒，如梯度凝膠電泳和核磁共振，但不同方法之間的結果通常不兼容。為此，該研究使用了國盛醫學?(ABIOM)的微流控芯片電泳系統，用于快速、準確和自動分離微小的精細HDL亞組分。

高分辨率磁共振成像(HRMRI)，一種處理血流和血管壁對比的無創成像技術，作為一種可靠的可視化血管壁形態和病理的成像方法，在無創體內分析中獲得了突出的地位。HRMRI突破了傳統體內血管檢查技術的局限性，為我們提供了有關動脈粥樣硬化組成的信息，如炎癥、壞死核心的存在和斑塊內出血。HRMRI上顱內斑塊的異質性增強是斑塊不穩定的標志，與有癥狀的顱內動脈粥樣硬化患者近期的缺血事件和卒中復發密切相關。該研究基于HRMRI研究HDL亞組分與顱內大動脈粥樣硬化斑塊特征之間的關系。

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研究方法：

本研究是一項基于中山大學第一附屬醫院患者的單中心橫斷面研究。從2020年7月1日至2022年12月31日，該研究招募了連續就診的患者，這些患者通過計算機斷層血管造影(CTA)或磁共振血管造影(MRA)檢測到單側顱內動脈狹窄或閉塞，伴有或不伴有相應癥狀。所有患者均行常規腦MRI/彌散加權成像(DWI)，然后行HRMRI。

根據患者的臨床表現(基于美國國立衛生研究院卒中量表(NIHSS)評分，這是一種廣泛用于衡量卒中嚴重程度的15項損害量表)以及斑塊是否與責任病變在同一側，將患者分為兩組:有癥狀斑塊組和無癥狀斑塊組。

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微流控芯片電泳用于HDL亞組分分析

所有HDL亞組分均在廣東國盛醫學科技有限公司(ABIOM)使用ABIOM的HDL亞組分測定試劑盒和微流控系統(MICEP-30)(中國廣州)根據制造商的說明進行檢測。通過特定算法分析HDL亞組分的方式，并以HDL-2b和HDL-3的組分百分比報告結果(圖1)。

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核磁共振成像掃描

病變部位定義為由MCA動脈粥樣硬化病變引起的管腔狹窄最嚴重的水平(圖2)。通過血管-腦脊液界面自動計算血管面積(VA)。管腔面積(LA)由血管-血液界面計算。選擇斑塊最厚的切片來測量直徑。壁面積(WA)計算為血管面積減去管腔面積。斑塊面積為病變部位的WA減去參考部位的WA。斑塊負擔計算為斑塊面積/病變部位血管面積× 100%。狹窄率公式為(病變部位1-LA /參考部位)× 100%。重構指數(RI)是指病變部位血管面積與參考部位血管面積之比。陽性重構(PR)定義為RI > 1.05;負重構(NR)定義為RI < 0.95;中度重構定義為RI在0.95 ~ 1.05之間。

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結果分析

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顱內動脈粥樣硬化患者的一般特征

患者一般特征的細節，包括人口統計學、臨床特征和實驗室數據。根據有無臨床癥狀(NIHSS評分)及斑塊是否引起臨床癥狀分為有癥狀斑塊組和無癥狀斑塊組。結果顯示，有癥狀斑塊患者血清HDL-2b水平顯著低于無癥狀斑塊患者。而HDL、HDL-2a 、HDL-3 水平差異無統計學意義。（表1）

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HDL變量與癥狀斑塊之間的關系

單因素logistic回歸分析顯示，白細胞計數、血小板計數、c反應蛋白和HDL-2b 與癥狀性斑塊顯著相關(表2)。

在多因素logistic回歸模型中評估HDL變量與癥狀斑塊之間的關系。在控制白細胞計數、血小板計數和c反應蛋白后，我們發現HDL-2b水平與癥狀性斑塊呈顯著負相關。在進一步調整高血壓、糖尿病總膽固醇和低密度脂蛋白后，結果相似。HDL-2a、HDL-3和總HDL水平與完全調整后癥狀斑塊的相關性無統計學意義。（表3）

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根據受試者工作特征(ROC)曲線模型分析，HDL-2b預測癥狀性斑塊的截斷點(約登指數)為0.21 mmol/L，預測效果最佳。（圖3）

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低和高HDL-2b水平患者的斑塊特征

在HRMRI上，HDL2b < 0.21 mmol/L的患者更容易出現斑塊增強和陽性重構。血清HDL-2b水平與斑塊負荷和管腔狹窄程度呈負相關。

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結論

該研究發現HDL-2b是預測顱內動脈粥樣硬化患者癥狀斑塊的潛在獨立標志物。隨后定量評估斑塊模式，發現HDL-2b與HRMRI顯示的斑塊增強、重構模式、斑塊負荷和狹窄率密切相關。HDL-2b < 0.21 mmol/L的患者在HRMRI上更容易出現斑塊增強，且斑塊負擔更大，狹窄率更高，更容易出現陽性重構。

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參考文獻：

[1]Zhezhi D, Zhihui Z, Shifeng Z, et al. HDL subfractions determined by microfluidic chip electrophoresis predict the vulnerability of intracranial plaque: A HRMRI study[J]. Clinica Chimica Acta, 2023: 117713.

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