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標記抗體或抗原：

將放射性同位素（如[^125^I]碘）標記到抗體或抗原上，形成放射性示蹤劑。標記物的選擇取決于待測物的性質和檢測需求。

免疫反應：

將標記的抗體或抗原與樣本中的待測物混合，發生特異性結合反應。由于標記物和待測物競爭性結合有限的抗體或抗原位點，因此放射性信號的強度與樣本中待測物的濃度成反比。

分離結合物和未結合物：

通過物理或化學方法（如離心、過濾、沉淀等）分離結合物（標記物與待測物結合的部分）和未結合物（游離的標記物）。

放射性測量：

使用放射性探測器（如閃爍計數器或γ計數器）測量分離后的結合物或未結合物的放射性強度。放射性信號的強弱反映了樣本中待測物的濃度。

數據分析：

根據標準曲線（通過已知濃度的標準品建立）計算樣本中待測物的濃度。